花生四烯酸（AA或ARA），是全顺式-5,8,11,14-二十碳四烯酸，化学式为C20H32O2，是一种ω-6多不饱和脂肪酸，为花生油中饱和的花生酸的相对物。花生四烯酸（arachidonic acid, AA）又名花生油烯酸，是一种重要的人体必须脂肪酸，也是人体中含量最高、分布最广的多不饱和脂肪酸，在维持机体细胞膜的结构与功能上具有重要的意义。目前，花生四烯酸在保健食品、化妆品和医药等领域得到广泛的利用。

多不饱和脂肪酸（DHA、EPA）可被分为ω-3脂肪酸和ω-6脂肪酸两大类，多不饱和脂肪酸和其他长链脂肪酸一样，也是细胞膜的基本组成物质。在那里，它们能在需要时挺身而出，参与免疫系统的信息交流和炎症因子的形成。简单来说，ω-6脂肪酸促进了炎症的发生，而它的近亲ω-3脂肪酸却能延缓身体自我防卫机制中那些不利的过度反应，以及抑制由此产生的炎症。此外，ω-3脂肪酸和ω-6脂肪酸能长期影响血液的流动和凝固的情况，进而影响血管腔的宽窄、血压以及血脂水平。

亚麻酸的学名为顺-9，顺-12，顺-15-十八碳三烯酸，速记法名称为18：3ω-3，是一种含有三个双键的ω-3脂肪酸。 亚麻酸以甘油酯的形式存在于深绿色植物中，是构成人体组织细胞的主要成分。有两种异构体:α-亚麻酸和γ-亚麻酸。前者学名“顺式十八碳三烯-9，12，15-酸"。属ω-3系列不饱和脂肪酸。为无色至浅黄色液体。在空气中易氧化，不溶于水，溶于乙醇，乙醚等有机溶剂。以甘油酯形式存在于许多干性油中，尤以豆麻籽油、苏子油等含量较高。是人体必需脂肪酸之一，对人体有诸多生理功能，如降血脂、防血栓等。除作保健品外，也是重要的化工原料。后者学名“顺式十八碳三烯-6，9，12-酸"。属ω-6系列脂肪酸。

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亚油酸是一种脂肪酸，分子式为C18H32O2，学名为顺,顺-9,12-十八碳二烯酸。亚油酸以甘油酯的形式存在于动植物油脂中，是以甘油酯形态构成的亚麻仁油、棉籽油之类的干性油、半干性油的主要成分。

为了进行细胞体外实验，研究花生四烯酸、长链多不饱和脂肪酸（DHA、EPA）、亚麻酸、亚油酸等脂肪酸对细胞的影响，科研人员首先需要对固体粉末状的花生四烯酸、长链多不饱和脂肪酸（DHA、EPA）、亚麻酸、亚油酸等进行溶解，现有技术中，部分人员采用甲醇、乙醇、氢氧化钠溶液等溶剂配制游离脂肪酸，虽然部分解决溶解性问题，但是上述溶剂本身对细胞就有毒性，而且这些溶剂是否影响软脂酸或软脂酸钠本身的性质也不清楚。

此外，溶解之后也会存在固体析出，溶解不彻底的情况，上述技术问题会导致实验浓度不准确，实验结果不可靠。

如何摸索花生四烯酸、长链多不饱和脂肪酸（DHA、EPA）、亚麻酸、亚油酸等溶解方式成为技术难点，本文建议使用牛血清白蛋白（BSA）可与自由脂肪酸结合的特点，采用BSA溶液作为溶剂溶解上述脂肪酸。该方法的优点是溶剂本身对细胞无毒性，针对不同的细胞实验在配置过程中应摸索合适的条件，以充分溶解自由脂肪酸，确保BSA与其充分结合，使油酸或油酸钠的精确浓度可控，最后配置的BSA-自由脂肪酸应符合生理情况下的摩尔比例，避免固体析出和脂毒性发挥。

经过反复摸索，利用BSA耦合的技术特点，已经可以实现6mmol/L浓度的花生四烯酸、6mmol/L浓度的gamma-亚麻酸、6mmol/L浓度的alpha-亚麻酸、6mmol/L浓度的亚油酸、6mmol/L浓度的月桂酸、以及6mmol/L的硬脂酸钠、6mmol/L浓度的EPA和DHA高脂细胞添加剂等，解决了花生四烯酸、长链多不饱和脂肪酸（DHA、EPA）、亚麻酸、亚油酸的溶解方法、液体溶液配置、BSA溶液配置、水溶液配置的技术难题。

参考文献

Liu, R. et al. MicroRNA-21 promotes pancreatic β cell function through modulating glucose uptake. Nat Commun. (2022)

Zhang, J. A.-O. et al. Lipid-induced DRAM recruits STOM to lysosomes and induces LMP to promote exosome release from hepatocytes in NAFLD. Sci Adv. (2021)

Yamaguchi, A. et al. DHA 12-LOX-derived oxylipins regulate platelet activation and thrombus formation through a PKA-dependent signaling pathway. J Thromb Haemost. (2021)

Lai, Z. Z. et al. Single-cell transcriptome profiling of the human endometrium of patients

with recurrent implantation failure. Theranostics. (2022)

发布于：陕西省